
WHO建议对发生咳嗽、发热、呼吸道感染等急性呼吸系统疾病、且在14天内去过武汉或与其他患者暴露接触者进行全面检测,并于1月17日发布nCov的实验室检测的临时指导(Laboratory testing for 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) insuspected human cases, Interim guidance, 17 January 2020)。指导指出采集的材料包括呼吸材料(鼻咽和口拭子、痰液、肺泡灌洗液等)和血清样本等,具体如下:
注*:要运输用于病毒检测的样品,请使用包含抗真菌和抗生素补充剂的病毒运输介质。对于细菌或真菌培养,运输干燥或使用少量无菌水运输。避免反复冷冻和解冻标本。运输过程中注意人员保护,避免暴露。
对于病毒检测,血清样本可用免疫学方法检测病毒,而更快速、更准确的检测建议使用RT-qPCR的方式检测nCov病毒核酸。由于病毒序列已知,只需选择合适的试剂、配套确定的引物,即可快速检测样本中病毒核酸的含量。
(Diagnostic detection of Wuhan coronavirus 2019 by real-time RTPCR, Protocoland preliminary evaluation as of Jan 13, 2020)
天根生化科技(北京)有限公司作为中国核酸提取和检测试剂上游供应的领军企业,已经多次为国家病毒性流行病的诊断及预防提供支持工作,在手足口疫情、甲型H1N1流感疫情检测中提供了超过1000万人份的病毒检测相关核心原料。2019年,天根生化又为生猪养殖和检疫单位提供自动化核酸提取仪以及超过3000万头份病毒核酸提取检测原料。
TIANGEN不但提供病毒的快速准确的提取和检测试剂,还同时提供便捷高效的组织研磨和自动化核酸提取仪,组成了病毒的提取检测的全套解决方案。
自动化核酸提取方案
TIANGEN全自动核酸提取仪是使用磁珠法进行核酸提取的自动化平台,该平台的应用不仅大大降低了检验检疫部门的工作量,更减少了手工提取的操作失误,确保了提取核酸质量的一致性和稳定性。
TIANGEN全自动核酸提取仪通量丰富(包括16、24、32、48、96通道),配套试剂可用于多种样本类型的核酸提取,更能够依据不同提取需求提供定制化试剂开发和仪器整合服务。
1.TGrinder H24 组织研磨均质仪
● 广泛适用于各类组织及粪便样本的研磨均质
● 研磨均质力度为传统仪器2-5倍
● 研磨均质效果均一,避免交叉污染
● 自动保护装置,保护实验人员安全
2.TGuide S32 全自动核酸提取纯化仪
● 样本处理量:1-32个样本
● 样本处理体积:20-1000 μl
● 样本类型:血液、细胞、组织、粪便、病毒等多种样本
● 样本处理时间:最快可8 min获得病毒核酸
● 操控模式:Windows Pad 和机屏按键双操控模式
● 平台开发性:开放平台,可自由搭配试剂
3.磁珠法病毒 DNA/RNA提取试剂盒(DP604)
● 适用广泛:能够从血清、血浆、拭子样本、组织处理液、各种病毒保存液中分离纯化高质量病毒DNA/RNA。
● 简单高效:本产品与TGuide S32自动核酸提取仪完美契合,提取病毒DNA/RNA得率高、纯度高、质量稳定可靠。
● 下游应用:纯化后的核酸适用于病毒PCR及荧光定量PCR的下游实验。
手动核酸提取方案
TIANGEN作为核酸提取及检测领域的领军者,拥有国内应用样本类型最广泛的核酸提取系列产品,能够应对冠状病毒检测的各类样本:血液、血清/血浆、组织、拭子、病毒等。
病毒基因组 DNA/RNA 提取试剂盒
● 高效率:快速纯化得到高质量病毒 DNA 和 RNA,重复性高
● 高纯度:完全去除污染物和抑制剂,方便下游应用
● 高安全性:无有机试剂抽提或乙醇沉淀
RNA病毒检测方案
1.Teasy自动化提取系统

TIANGEN研发的FastKing One Step RT-qPCR Kit (Probe)(FP314)特别为检测样本中的微量基因设计,是基于探针的一步法反转录荧光定量检测试剂盒。试剂盒中的King RTase是分子改造后的新型逆转录酶,具有更强的RNA亲和性和热稳定性,大大提高了反转录效率和对复杂二级结构RNA模板的延伸能力;PCR过程中采用了新型热启动 Taq DNA聚合酶,使PCR反应具更高的扩增效率和特异性。此外,试剂盒对组分进行了最大限度的简化,将taq和MLV酶混合为Enzyme mix,另将离子buffer、dNTPs、PCR稳定剂和增强剂预混为Master Mix,实验中无需多组分混合,操作简单便捷。
● 高效:性能优良的逆转录酶和DNA聚合酶保证了极高的反应效率;
● 抗逆:通读GC含量高,二级结构复杂的RNA模板;
● 普适:对不同物种来源及杂质较多的RNA模板的适用性高;
● 灵敏:低至1 ng 的模板也能被准确识别,特别适合低丰度模板。
RNA病毒检测实例
使用TGuide S32磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒(DP604)提取禽流感H5病毒核酸,采用禽流感H5病毒检测引物及探针,使用TIANGEN FastKing One StepRT-qPCR Kit (Probe)(FP314) 进行RT-qPCR 检测, RT-qPCR 检测仪器为ABi7500Fast。综合上述200 μl禽流感H5病毒抗原(10-2、10-3、10-4、10-5、10-6和10-7稀释倍数) 样本病毒核酸提取实验结果可以看出,病毒核酸提取结果得率良好,能够满足反转录、PCR、RT-PCR、荧光定量PCR 等后续实验需求;定量检测灵敏度高、重复性好、梯度稀释线性度好,对于不同浓度的病毒核酸样本都能精确定量检测。